在日常使用氣相色譜儀時,除去樣品的前處理部分,儀器使用的第一步就是設(shè)置儀器參數(shù)與方法,而設(shè)置的第一步是進樣口的參數(shù)設(shè)置。
氣相色譜儀進樣器參數(shù)的設(shè)置,與測定的樣品對象和樣器的類型都關(guān)。參數(shù)設(shè)置適宜,色譜峰分離效果好;設(shè)置不當,可能導(dǎo)致本來能夠分開的組分實際上沒有分開。因此,實驗中常常優(yōu)化進樣參數(shù)。
根據(jù)經(jīng)驗,部分進樣參數(shù)的設(shè)置,如進樣量、洗針次數(shù)等是相同的,故下面以最為常用的手動進樣器為例,探討一下進樣器參數(shù)設(shè)置對分離有何影響。
進樣器的參數(shù)設(shè)置不當,可能會出現(xiàn)如下情況:
1、進樣量
進樣量的大小直接影響定量結(jié)果。若進樣量過大,色譜峰峰形不對稱,峰變寬,分離度變小,或保留值發(fā)生變化,峰高、峰面積與進樣量不成線性關(guān)系,無法定量;若進樣量太小,會因檢測器靈敏度不夠,不能檢出。對于填充柱,進樣量影響不是太大,但進樣量不當也會造成出現(xiàn)混合峰;用FID時,進樣量太大會使火焰熄滅。
2、進樣速度
進樣速度要快,若進樣緩慢,樣品汽化后被載氣稀釋,導(dǎo)致峰形變寬、峰不對稱,既不利于分離也不利于定量。
3、進樣針的清洗
進樣針如沒清洗干凈,上一次進樣的殘留樣品會干擾下一次的分析,即進樣針的“記憶效應(yīng)”,會影響分析結(jié)果。
進樣器參數(shù)包括進樣量、進樣時間、進樣針的清洗次數(shù)以及具體進樣技術(shù)等,下面分別介紹。
1、進樣量與進樣時間
色譜柱最大允許進樣量可以通過實驗確定。其它實驗條件不變,僅逐漸加大進樣量,直至所出的峰的半峰寬變寬或保留值改變時,此進樣量就是最大允許進樣量。如內(nèi)徑3-4mm,柱長2m,固定液用量為15-20%的填充柱,液體進樣量為0.1-10μL;采用氫火焰離子化檢測器(FID)時,進樣量一般小于1μL。進樣時,要求速度快,這樣可以使樣品氣化后隨載氣以濃縮狀態(tài)進入柱內(nèi),峰的原始寬度窄,有利于分離。
2、進樣器的“記憶效應(yīng)”
為了減小或消除樣品記憶效應(yīng)的干擾,更換樣品時要清洗,用同一樣品多次進樣時也要用樣品潤洗進樣器。進樣器暫時不用時,更要徹底清洗,否則殘留其中的樣品可能將針芯粘牢,造成進樣器報廢。使用自動進樣器的用戶,也應(yīng)注意保證進樣器的清潔。
3、進樣技術(shù)的影響
定量分析的精密度與準確度,除儀器本身的原因外,主要依賴于進樣的重復(fù)性和操作技術(shù)。針對不同規(guī)格毛細管柱及特殊的進樣方式(柱上進樣、分流/不分流進樣等),對插針的快慢、位置、深度和操作人員的熟練程度以及刻度讀數(shù)的準確度都有一定的要求。